微生物菌种药物敏感性试验

微生物菌种药物敏感性是测定微生物菌种对抗菌药物的耐受程度，主要通过测定抗菌药物对待测微生物的最低抑菌浓度（Minimum Iinhibitory Concentration, MIC）来实现。

目前，微生物药物敏感性检测主要依据CLSI、EFSA、EUCAST、ISO、WS等国内外标准进行，检测方法包括纸片扩散法、肉汤/琼脂稀释法和Etest法。其中Etest法是综合利用扩散法和稀释法的原理，预先设定连续稳定的抗菌药物浓度梯度进行抗菌药物MIC值的定量检测，实现制药、食品、饲料等行业生产用菌株的药物敏感性测定。

检测项目：

检测菌种：

检测方法：

1  纸片法

纸片法也被称作纸片扩散法，是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散。在药物扩散的同时，纸片周围抑菌浓度范围内的测试菌不能生长，而抑菌浓度范围外的菌株则继续生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。

不同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而可能不同，抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈越大，MIC越小。

纸片法目前已经被认为是一种权威的用药指导依据，但由于该方法只能定性，因此纸片法通常被用来做药物敏感性试验。

2  牛津杯法

牛津杯法又称杯碟法，将已灭菌的牛津杯置于试验平板中，往杯中注入一定量的待测样品，培养一段时间后测定抑菌圈大小的一种方法。由于待测样的抑菌效果不同，因此抑菌圈的大小也会不同。

3  二倍稀释法

在抑菌实验中，为了评判某种药物的抗菌功效，最低抑菌浓度（MIC）是非常重要的指标，利用二倍稀释法可以得到MIC值。凡能抑制试验菌生长的最高药物稀释度为该药的最低抑菌浓度（MIC）。

将待检药物先以合适的液体培养基在试管或96孔板内进行连续稀释，每管内再加入一定量实验菌液，培养后，观察细菌生长情况，与空白对照比较，以肉眼观察培养基清亮且未见细菌生长的最低浓度判定为该药物的最低抑菌浓度。将无细菌生长的药物和菌种划线接种到新的琼脂平板上进行培养，进一步确定该药物的MIC。通常每菌重复3次，求平均值。

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