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降解组测序

作者:小编 更新时间:2022-05-07 点击数:

        鉴定microRNA(miRNA)调控的靶基因是阐释miRNA复杂调控机制的关键。在生物体内,miRNA除了抑制mRNA的翻译外,也会诱导mRNA被剪切降解,从而调控基因表达,发挥生物学功能。相比于动物,在植物中miRNA诱导基因剪切降解的方式会更为普遍。

        降解组测序(Degradome Sequencing)主要针对miRNA介导的剪切降解片段进行深度测序,从实验中筛选miRNA作用的靶基因,并结合生物信息学分析优势,确定降解片段与miRNA精确的配对信息。

        该技术既摆脱了仅利用生物信息学预测靶基因带来的高假阳性,又避免了常规靶基因鉴定手段(如5’ RACE)低通量耗时耗力的不足,显著促进了miRNA的功能研究。且能从细胞或组织中准确高效地筛选出miRNA的靶基因,为研究miRNA与其对应的靶基因的相互关系提供准确、高效的筛选手段。


    1. 质检文件:样本质检报告和质控报告;

    2. 测序数据质量评估;

    3. 鉴定mRNA降解片段;

    4. 降解组密度文件(Degradome Density File)的生成;

    5. miRNA靶基因生物信息学预测;

    6. miRNA靶基因的实验性确认;

    7. t-plot构建;

    8. 多样本的miRNA靶基因的比较分析(两个及以上样本有此分析内容)。



    1. 高通量:一次测序可鉴定得到1千万条以上的miRNA作用的靶基因序列信息,可充分覆盖该物种中的所有mRNA降解片段;

    2. 高准确性:可实现从几个到几十万个拷贝的精确计数,提供Q30以上数据,确保数据分析的准确性;

    3. 高分辨率:可精确检测到单碱基差异;

    4. 重复性好:深度测序保证了检测的随机性,背景噪音低,不需要技术的重复;

    5. 全方位服务:提供miRNA鉴定、靶基因筛选等研究的一站式解决方案。



(一)样品类型

  1. 总RNA:样品浓度≥200 ng/µl,样品总量≥30 µg;样品纯度: OD260/280为1.8~2.2,OD260/230≥1.0,260 nm处有正常峰值。RNA完整性: 电泳检测28S/18S≥1.5。

  2. 组织:植物组织样品取样后用锡箔纸包裹并标注,立即液氮速冻,保存于液氮或超低温冰箱中;动物组织、细胞或菌体取样后置于冻存管中并标注,立即液氮速冻,保存于液氮或超低温冰箱中。请尽量使用新制备的样品且样品量至少满足3次以上提取(普通样品0.6g以上,RNA含量少的花、果实等组织需要加量送);

 

(二)样本运输

  1. 总RNA样品请溶于RNase-free H2O或乙醇中,置于1.5 ml RNase-free离心管中,管上注明样品名称、浓度以及制备时间,管口使用Parafilm封口,干冰运输;

  2. 植物组织、动物组织、细胞或菌体取样后置于冻存管中并标注,使用足量的干冰运输,并且尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。


(三)飞凡检测质检报告流程:

    1、 提供产品资料

    2、 工程师根据您品资料的产品推荐合适检测项目,并给出报价

    3、 确认报价没有问题,然后把样品送到我们实验室

    4、 支付检测费用,安排检测

    5、检测完成,出具检测报告,邮寄给客户

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关于飞凡



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飞凡检测致力于打造国内专业的第三方检测服务公司,不断优化整合市场检测资源,飞凡检测与多家科研院所,如上海同济大学,苏州大学,SGS,TUV,以及国内众多知名的检测公司进行深度合作,共同为国内制造业服务,为中国的制造业开拓海外市场保驾护航,为我们日常生活的健康安全树立标杆;公司目前工程师百余人,95%以上是本科以上学历;我们合作的实验室通过CNAS,CMA(EZ),所出具的任何一张报告都有CNAS,CMA资质,确保出具的每份报告都具有权威的法律效力。



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