全基因组甲基化测序
DNA甲基化是表观遗传学（Epigenetics）的重要组成部分，在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育以及人类肿瘤发生中起着重要的作用。Bisulfite处理能够将基因组中未甲基化的胞嘧啶与甲基化的胞嘧啶区分开来，因此成为表观遗传学研究的经典实验方法。Bisulfite处理与高通量测序技术相结合的测序方法—Bisulfite Sequencing能够绘制单碱基分辨率的DNA甲基化图谱。
特定物种的高精确度甲基化修饰模式的分析，为广泛应用于细胞分化、组织发育等基础机制研究，以及动植物育种、人类健康与疾病研究奠定基础。将样本DNA用亚硫酸氢钠处理，未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶（5mC）则不受影响；而在PCR扩增反应中，尿嘧啶会被DNA聚合酶识别为胸腺嘧啶；最后采用特定的算法将测序所得reads与基因组进行比对就可获知样本DNA的甲基化情况。
信息分析
1、Bisulfite-seq数据产出统计： 数据产出总量；C的测序深度统计；基因组覆盖度统计，全基因组甲基化率统计；
2、计算C碱基的甲基化水平
3、全基因组甲基化水平数据分布趋势
a）甲基化C碱基中CG, CHG 与CHH的分布比例
不同分布类型的甲基化C位点在不同物种基因组中出现比例不同，因此，各类型mC ( mCG、mCHG和mCHH ) 的位点数目，及其在全部mC的位点中所占的比例 ( 例：mCHG所占比例= mCHG数目/mC的总数 )，在一定程度上反映了特定物种的全基因组甲基化图谱的特征。
b）CG、CHG和CHH中的所有C的甲基化水平
不同分布类型的C 碱基( CG、CHG和CHH )，其甲基化水平在不同物种间，甚至同一物种不同细胞类型间都存在差异。此图统计每种类型 ( CG、CHG和CHH ) 甲基化的C甲基化水平的分布。
c）统计不同基因区域内CG、CHG和CHH中C的甲基化水平
对于在不同基因区域CG、CHG和CHH中的C，根据如下的公式统计其平均甲基化水平：平均甲基化水平=100*支持甲基化的reads的数目/总的reads的数目。（如：CG平均甲基化水平=100* 支持CG甲基化的reads/（支持CG甲基化的reads+支持CG非甲基化的reads)
d）CHG，CHH中甲基化C附近的9bp序列的序列特征分析
分析非CG位点的甲基化的C附近碱基的分布情况，统计不同甲基化模式(CHG和CHH)出现的概率。图形横轴（x 轴）表示碱基位置，其中第四位上为用于分析C 碱基。纵轴（y 轴）为熵值（0 为最小值，表示四种碱基比例均匀，都为25%，2 为最大值，表示四种碱基分布最不均匀，即只有一种特定碱基出现，如第四位的C 与第六位的G）。
4、全基因组甲基化图谱
4.1染色体的甲基化分布
选取一条染色体，从染色体水平来描述甲基化C碱基的的分布情况。通过划窗口的方法来计算每个窗口的甲基化水平，下图窗口大小为10k。
4.2不同基因组区域的甲基化分布特征
不同的基因组区域具有各自不同的生物学功能，下图中以柱形图的形式表示甲基化分布情况，有助于进一步了解这些区域的甲基化图谱特征。
5、差异性甲基化区域（DMRs）分析
比较两组样品间甲基化水平的差异对人类疾病研究、生长发育研究以及生物学的基础研究都具有重要的意义。这两组样品可以是不同类型的个体，可以是同一个体的不同组织，也可以是同一组织在不同时间点的取样。
5.1基于methyKit的差异甲基化(DMRs)分析
5.2基于BSmooth的差异甲基化(DMRs)分析
5.3DMRs相关基因的GO聚类分析
Gene Ontology（简称GO）是一个国际标准化的基因功能分类体系，提供了一套动态更新的标准词（controlled vocabulary）来全面描述生物体中基因和基因产物的属性。GO总共有三个ontology（本体），分别描述基因的分子功能（MF: molecular function）、所处的细胞位置（CC: cellular component）、参与的生物过程（BP: biological process）。
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