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itraq蛋白质组学

作者:小编 更新时间:2022-08-01 点击数:

        iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation)技术是由AB SCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝对定量技术。该技术利用多种同位素试剂标记蛋白多肽N末端或赖氨酸侧链基团,经高精度质谱仪串联分析,可同时比较多达8种样品之间的蛋白表达量,是近年来定量蛋白质组学常用的高通量筛选技术。

  iTRAQ标签简图以及定量方法见下图:

 

 

  该技术采用4种或8种同位素编码的标签,通过特异性标记多肽的氨基基团,尔后进行串联质谱分析,可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。iTRAQ的4种同位素标记试剂由4种相对分子质量分别为114、115、116和117的报告基团(reporter group),相对分子质量分别为31、30、29 和28 的质量平衡基团(balance group)以及一个相同的肽反应标记试剂基团(peptide reactive group)组成。不同的报告基团分别与相应的平衡基团相配后,相对分子质量均为145,即等量异位标签(isobaric tag)。其原理是首先将蛋白质裂解为肽段,然后用iTRAQ试剂进行差异标记。

  同位素标记试剂结构为:


1、数据产出统计

2、蛋白质鉴定结果

3、蛋白质定量结果

4、蛋白质GO分析

5、蛋白质COG分析

6、蛋白质Pathway代谢通路分析

7、差异蛋白GO富集分析

8、差异蛋白的Pathway富集分析



1、待检测蛋白要求:完整无明显降解的总蛋白,蛋白量最低300ug,浓度最低为5ug/ul,使用二维电泳试剂提取;

2、直接提供组织或细胞,细胞样品,细胞量> 107;组织样品,动物、微生物组织湿重>10mg;植物鲜嫩组织>100mg;体液样品,血液体积>500ul;后续操作全部由天科生物来做,您只需要提供样本,其他试剂都无需提供;

3、蛋白运输:24小时内可以4度运输;

4、蛋白长期保存:-20℃。

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