市面上四种植物遗传转化策略分析

        植物遗传转化是将重组质粒导入受体基因组的过程，通常使用的策略包括农杆菌介导法、基因枪法、聚乙二醇（PEG）法和花粉管通道法等。

• 农杆菌介导法：世界上第一例转基因植物采取的就是此方法。根癌农杆菌和发根农杆菌属于革兰氏阴性菌，可广泛侵染双子叶植物，在一定条件下还能侵染单子叶植物。根癌农杆菌含有Ti质粒，该质粒上的T-DNA可插入到植物基因组中，诱导瘤状物的形成。因此，将目标序列插入到T-DNA中，可通过Ti质粒的载体作用，使目标序列整合到受体基因组中并表达。具体地，农杆菌介导法又可细分为原生质体共培养法、叶盘法、创伤植物感染法等，可根据受体材料类型选择合适的农杆菌介导法。

  
  

• 基因枪法：基因枪法又被称为微弹轰击法，其原理是将携带外源DNA的金属粒子打入植物细胞或组织中，实现基因转移。基因枪法的优点包括：无宿主限制，靶受体类型广泛（具有潜在分生能力的细胞或组织都可），步骤简单易操作，不需制作原生质体等。基因枪法的缺点是整合位点具有随机性，拷贝数往往较多，基因不容易稳定表达（后代容易出现突变、外源基因丢失）等，且基因枪法较为昂贵。

  
  

• PEG法：PEG法的原理是通过聚乙二醇改变受体细胞的细胞膜通透性，从而使外源DNA更容易进入原生质体。该方法不需要昂贵、特殊的设备，实验结果比较稳定。原生质体是除去细胞壁的不完整细胞，是遗传操作的好材料。PEG法可瞬间表达外源基因，也可获得稳定表达的转基因细胞系或者转基因植株。

  
  

• 花粉管通道法：花粉管通道法的原理是利用植物受粉后，雌蕊柱头上萌发形成花粉管通道，外源DNA液通过微量注射器进入花中。观察后代的变异，筛选转基因植物。该方法的特点是不需要经过组织再生，省去人工组培过程，并且，后代植株中无镶嵌体的存在，但是转化率低、重复性不高。

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